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安徽外泌体small RNA测序

来源: 发布时间:2023年02月01日

    当肽单体聚集成不溶性淀粉样蛋白时引起的血管淀粉样变性是一种普遍的与年龄相关的病理学。主动脉内侧淀粉样蛋白(AMA)是醉常见的人类淀粉样蛋白,由50个氨基酸的肽medin组成。新出现的证据表明细胞外囊泡(EV)是细胞外基质(ECM)中病理性淀粉样蛋白积累的介质。为了确定AMA随年龄增长的形成机制,我们探讨了血管平滑肌细胞(VSMC)衰老、EV分泌和ECM重塑对介质积累的影响。在初级VSMC分泌的EV中检测到Medin。在体外脱细胞ECM中,小的圆形介质聚集体与EV标记共定位,沉积在ECM中的EV表面显示介质。用抑制剂减少EV分泌可减弱细胞外基质中介质的聚集和沉积。人类受试者主动脉壁中的介质积累与年龄密切相关,VSMC衰老增加了EV分泌,增加了EV介质负荷并触发了原纤维样介质的沉积。蛋白质组学分析显示VSMC衰老引起EV货物和ECM组成的变化,从而导致EV-ECM结合增强并加速medin聚集。蛋白多糖HSPG2的丰度在衰老的ECM中增加,并与EV和介质共定位。孤立的EV选择性地与ECM中的HSPG2结合,其敲低减少了原纤维样介质结构的形成。这些数据将ECM中VSMC衍生的EV和HSPG2确定为介质积累的关键介质,有助于与年龄相关的AMA发展。 肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞(免疫细胞、神经细胞、干细胞),都可以产生并释放外泌体。安徽外泌体small RNA测序

    液体活检是手术活检的微创替代方法,涵盖不同的分析物,包括细胞外囊泡(EV)、循环肿瘤细胞(CTC)、循环tumourDNA(ctDNA)、蛋白质和代谢物。几乎所有细胞都会释放外泌体,但恶性细胞释放率更高。它们是封装原始细胞的天然货物,因此可以提供了解tumour景观的窗口。外泌体通常被批量分析,这阻碍了从大型宿主EV背景分析罕见的肿瘤特异性EV亚群。在这里,我们在体外和体内分离了外泌体亚群,并表征了它们的表型和通用货物。我们使用5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)来诱导内源性荧光肿瘤特异性外泌体(EVPpIX)的释放。对来自胶质母细胞瘤(GBM)细胞系的五个不同亚群(EVPpIX、EVCD63、EVCD9、EVEGFR、EVCFDA)的分析揭示了独特的转录组谱,其中EVPpIX转录组显示与其他亚群的致瘤过程更接近。同样,与来自血浆的大量EV相比,从GBM患者血浆中分离肿瘤特异性外泌体显示GBM相关基因富集。我们建议外泌体种群的分离有助于检测和分离肿瘤特异性EV以进行疾病监测。 安徽外泌体small RNA测序外泌体主要呈圆形或椭圆形,杯口样,直径在40-200 nm之间。

    外泌体在心肌梗死后的诊治中的成功应用取决于对其在心脏信号传导和调节中的作用的更好理解。在这里,我们报道了心肌梗死(MI)后循环的外泌体携带LncRNATUG1,它通过抑制HIF-1α/VEGF-α轴来下调血管生成,并且这种作用可以通过远程缺血调节(RIC)来抵消。通过左冠状动脉结扎(MI模型)和再灌注(缺血/再灌注I/R模型)诱发MI的大鼠被随机分为RIC、MI(I/R)或假手术(SO)对照。还利用了一项队列研究和一项针对MI患者的随机对照试验的数据,前者涉及未接受经皮冠状动脉介入诊治(PCI)的患者,后者涉及接受PCI的患者。外泌体浓度在大鼠(MI和I/R模型)以及人类(有和没有PCI)的干预组(RIC与对照组)之间没有差异。然而,MI和I/R外泌体减弱了HIF-1α、VEGF-α和内皮功能。LncRNATUG1在MI和I/R外泌体中增加,但在SO和RIC外泌体中减少。HIF-1α表达随MI和I/R外泌体而下调,但随RIC外泌体而增加。外泌体抑制通过RIC外泌体抑制HIF-1α上调。VEGF-α被鉴定为HIF-1α调节的靶基因。HIF-1α的敲低降低了VEGF-α、内皮细胞管形成。HIF-1α的过度表达产生相反的效果。用外泌体抑制剂GW4869和HIF-1α抑制剂si-HIF-1α转染和共转染293T细胞证实了外泌体-LncRNATUG1/HIF-1α/VEGF-α通路。

    急性肺损伤(ALI)仍然与高死亡率相关。越来越多的证据表明,外泌体包裹的CC16对ALI具有保护作用。然而,临床前研究中使用的重组CC16(rCC16)的剂量对于临床应用来说是超生理的。细胞外囊泡(EV)是由哺乳动物细胞内源性产生的纳米囊泡。我们的研究表明,CC16通过小型EV释放,EV封装的CC16(sEV-CC16)具有抗yan活性,可保护小鼠免受脂多糖(LPS)或细菌诱导的ALI的侵害。此外,sEV-CC16可以激huoDNA损伤修复信号通路。与此活动一致,我们观察到Cc16敲除(KO)的肺部DNA损伤比野生型(WT)小鼠更严重。从机制上讲,我们阐明了CC16通过与热休克蛋白60(HSP60)结合来抑制NF-kB信号激huo。我们得出结论,sEV-CC16可以通过减少NF-kB信号来抑制炎症和DNA损伤反应,从而成为ALI的潜在诊治剂。 干细胞外泌体具有抑制纤维化、提高组织修复潜力等重要生物学功能。

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍,通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后,10000xg离心1h,可将直径在30-150nm之间,且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体,为了进一步纯化胎盘相关外泌体,将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后,加入非线性蔗糖密度梯度层,10000xg超速离心5h,将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证,确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。外泌体miR-151a可以预测GBM对替莫唑胺的化疗反应,且有希望成为难治性GBM的zhiliao靶点。黑龙江植物外泌体WB

miR-155可分泌至外泌体中介导邻近胰腺ai细胞的吉西他滨耐药,是潜在的胰腺ai化疗疗效预测因子。安徽外泌体small RNA测序

从体液中高精度分离小细胞外囊泡 (sEV) 对于开发下一代液体活检和再生疗法至关重要。然而,目前的 sEV 分离方法需要专门的设备和耗时的协议,并且难以产生高纯度的 sEV 亚群。在这里,我们介绍了通过波柱激发共振 (ANSWER) 进行的声学纳米级分离,它允许单步、快速(<10 分钟)、高纯度(>96% 小外泌体,>80% 外泌体)分离来自无需任何样品预处理的体液样品。粒子通过激发共振以尺寸选择性的方式迭代偏转。这种以前未发现的现象使用表面声波在流体中产生虚拟的、可调谐的柱状声场模式。无需样品预处理或复杂纳米制造方法的高精度 sEV 分离已使用 ANSWER 进行了证明,显示出作为强大工具的潜力,可以对 sEV 亚群的复杂性、异质性和功能进行更深入的研究。安徽外泌体small RNA测序

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