当肽单体聚集成不溶性淀粉样蛋白时引起的血管淀粉样变性是一种普遍的与年龄相关的病理学。主动脉内侧淀粉样蛋白(AMA)是醉常见的人类淀粉样蛋白，由50个氨基酸的肽medin组成。新出现的证据表明细胞外囊泡(EV)是细胞外基质(ECM)中病理性淀粉样蛋白积累的介质。为了确定AMA随年龄增长的形成机制，我们探讨了血管平滑肌细胞(VSMC)衰老、EV分泌和ECM重塑对介质积累的影响。在初级VSMC分泌的EV中检测到Medin。在体外脱细胞ECM中，小的圆形介质聚集体与EV标记共定位，沉积在ECM中的EV表面显示介质。用抑制剂减少EV分泌可减弱细胞外基质中介质的聚集和沉积。人类受试者主动脉壁中的介质积累与年龄密切相关，VSMC衰老增加了EV分泌，增加了EV介质负荷并触发了原纤维样介质的沉积。蛋白质组学分析显示VSMC衰老引起EV货物和ECM组成的变化，从而导致EV-ECM结合增强并加速medin聚集。蛋白多糖HSPG2的丰度在衰老的ECM中增加，并与EV和介质共定位。孤立的EV选择性地与ECM中的HSPG2结合，其敲低减少了原纤维样介质结构的形成。这些数据将ECM中VSMC衍生的EV和HSPG2确定为介质积累的关键介质，有助于与年龄相关的AMA发展。 外泌体被包裹在坚硬的双层膜中，双层膜保护外泌体的内容物，使外泌体能够在组织中长距离移动。江苏外泌体tmt
外泌体的异质性包括：大小异质性、含量异质性、功能异质性和细胞来源异质性。尺寸不等可能是由于MVB界膜内陷不均匀，导致液体和固体的总含量不同，外泌体可能包含由不同大小范围定义的亚群。大小异质性也会导致不同量的外泌体含量；微环境和细胞固有的生物学可能影响外泌体的含量及其生物学标志物。外泌体可含有膜蛋白、胞质和核dan白、细胞外基质蛋白、代谢产物和核酸，即mRNA、非编码RNA种类和DNA；外泌体对受体细胞的影响可以不同，因为它们的细胞表面受体表达各不相同，这样的功能性有不同的表现，1.诱导细胞存活，2.诱导细胞凋亡，3.诱导免疫调节等；异质性也可以基于外泌体的起源organ和组织，包括它们是否来自ai细胞，使它们具有独特的特性，如对某些organ的趋向性和特定细胞类型的摄取。所有这些特征的组合将有可能引起更高阶的复杂性和外泌体的异质性。 湖南外泌体PKH26外泌体可帮助预防胎盘感ran。
目前市面上开发的外泌体提取试剂盒，是根据外泌体表面由类似于细胞膜的脂质双分子层具有一定疏水性这一特性，用试剂捆绑水分子，从而可通过常规离心收集沉淀获取外泌体。这种快速提取外泌体的方法虽简便快捷、样本需求少、对设备要求低，但与差速离心方法类似，其分离得到的沉淀包含其他细胞分泌的囊泡，且血清中含有大量血清蛋白分子，成分复杂，很可能掺杂一些未知的疏水大分子物质。Sabapatha等曾根据来源于胎盘的外泌体表面特异表达***P这一特性，使用耦合到磁珠的抗***P抗体，采用磁珠分选方法分离血浆中胎盘来源外泌体。此法可以提取的胎盘外泌体量少，不适用于大规模提取制备，且免疫磁珠价格昂贵，不利于提取技术的普及。
细胞衍生的小细胞外囊泡(sEV)具有抗ai作用。然而，应加强它们的抗ai潜力以提高临床适用性。在此，我们从通过柔性接头在质膜上表达IL2的工程化JurkatT细胞生成了IL2-tetheredsEVs(IL2-sEVs)，以诱导自分泌效应。IL2-sEVs在不影响调节性T(Treg)细胞的情况下增加CD8+T细胞的抗ai能力，并下调黑色素瘤细胞中的细胞和外泌体PD-L1表达，导致它们对CD8+T细胞介导的细胞毒性的敏感性增加.它对CD8+T细胞和黑色素瘤细胞的作用是由几种IL2-sEV驻留microRNAs(miRNAs)介导的，它们的表达被IL2的自分泌作用上调。在miRNA中，miR-181a-3p和miR-223-3p显着降低了黑色素瘤细胞中的PD-L1蛋白水平。有趣的是，miR-181a-3p在抑制Treg细胞活性的同时增加了CD8+T细胞的活性。IL2-sEVs抑制携带黑色素瘤的免疫活性小鼠的肿瘤进展，但不抑制免疫缺陷小鼠的肿瘤进展。IL2-sEVs与现有抗ai药物的组合通过降低体内PD-L1表达显着提高了抗ai疗效。因此，IL2-sEVs是潜在的CA免疫诊治剂，可通过重新编程miRNA水平来调节免疫细胞和ai细胞。 示踪病毒使用CD63作为生物标记，通过将CD63与荧光蛋白偶联，带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上。
外泌体的产生过程涉及质膜的双重内陷和含有腔内囊泡intraluminalvesicles(ILVs)的细胞内多泡体multivesicularbodies(MVBs)的形成。ILV醉终通过质膜的损伤和MVB胞吐作用以直径范围约为40-160nm的外泌体形式分泌1).质膜的di一次内陷形成杯状结构，包括细胞表面蛋白和与细胞外环境相关的可溶性蛋白2).这导致了早期分选内体early-sortingendosome(ESE)的新生形成，在某些情况下可能直接与预先存在的ESE合并[1]。ESEs可以成熟为晚期分选内体late-sortingendosomes(LSEs)，醉终生成MVBs，也称为多囊泡内体。MVBs由胞内体界膜向内内陷（即质膜双重内陷）形成。这一过程导致MVB含有几种ILV（未来的外泌体）。MVB既可以与溶酶体或自噬体融合降解，也可以与质膜融合释放所含的ILV作为外泌体。根据外泌体数据库的醉新更新列表[2]，包含9769个蛋白质、3408个mRNA、2838个miRNA和1116个脂质。外泌体的这些内容物可作为CA进展的预后标志物和（或）分级依据。同时调节tumour生长、转移、血管生成，介导肿瘤细胞耐药。 外泌体功能取决于来源的细胞，可参与到机体的免疫应答、细胞迁移、细胞分化、中流侵袭等方面。腹水外泌体荧光标记
血浆外泌体PD-L1除可影响患者预后外，还与免疫zhiliao的反应密切相关。江苏外泌体tmt
年龄相关性黄斑变性(AMD)是失明的主要原因。视力丧失是由视网膜色素上皮细胞(RPE)和光感受器萎缩和/或视网膜和脉络膜血管生成引起的。近日，JEV杂志上的一篇报道使用具有补体因子HY402H高风险多态性的AMD患者特异性RPE细胞对外泌体、它们的载体和在疾病病理学中的作用进行综合分析。研究表明AMD RPE的特点是增强的极化外泌体分泌。多组学分析表明，AMD RPE EV携带RNA、蛋白质和脂质，它们介导关键的AMD特征，包括氧化应激、细胞骨架功能障碍、血管生成和玻璃膜疣积聚。江苏外泌体tmt
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