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来源: 发布时间:2023年02月18日

    外泌体在生物相容性、药物装载能力、体内靶向性、血流稳定性和可工程化等方面具有独特的优势,成为递送基因编辑核糖核旦白复合物的理想递送载体。现有将Cas9RNP包载至外泌体中的方法主要依赖细胞内源性技术,需要事先在细胞中转染CRISPR-Cas9质粒,转录翻译后在特定时间收集该细胞的外泌体,步骤较多,复杂费时且可控性差。本研究采用优化的电穿孔方法避免了质粒转染的复杂过程,在细胞外直接将Cas9RNP装载至肝成纤维细胞来源的外泌体中,制备获得的外泌体基因编辑纳米颗粒(ExosomeRNP)可成功将RNP递送至靶细胞内产生高效的基因编辑效应。值得注意的是,在动物体内ExosomeRNP可通过肝脏蓄积和同源靶向作用,将RNP精细递送至肝脏组织中,避免非靶organ的基因编辑,提高体内基因组编辑的安全性和精细性。 外泌体的形成始于细胞内陷,成熟于多囊泡胞内体,终于膜融合。江苏水果外泌体wb检测

自身免疫性疾病(ADs)是一组由免疫系统攻击自身organ或组织,导致免疫复合物形成和沉积的慢性炎症性结缔组织疾病,其病因和发病机制尚不明确,目前认为与遗传易感性、环境因素和免疫失调有关。外泌体是由脂质、蛋白质和核酸组成的球形脂质双分子层囊泡,通过囊泡转运系统传递信号分子调控靶细胞的功能和形态,从而参与细胞凋亡或增殖、细胞因子产生等多种生物学过程。近年来,大量研究表明外泌体主要通过调节靶细胞的功能来介导细胞间的通讯,促进ADs的发sheng发展。相反,得益于外泌体特殊的生物学特性,例如膜结合能力强,稳定性好,避免免疫排斥反应等,它还可以用作ADs的生物标志物和药物递送载体,在ADs的诊断和诊治中具有一定的应用价值。   山东外泌体分离干细胞外泌体有减少细胞凋亡、促进血管生成、抑制纤维化等重要生物学功能,在调控组织再生方面有好的前景。

    生物囊泡含有原始细胞的遗传物质和蛋白质,通常用于细胞间的局部或全身通讯。目前,关于生物囊泡作为诊治策略或药物递送载体的研究主要集中在外源产生的生物囊泡上。然而,复杂的纯化过程导致的产量和纯度的限制仍然阻碍了它们的临床转化。醉近,据报道,包括细胞和细菌在内的活生物体可以在体内自动产生功能性/诊治性生物囊泡。因此,利用生物体在体内产生内源性生物囊泡作为药物/生物信息传递载体已成为一种潜在的诊治策略。本文就原位生物自产生物囊泡的发展现状及应用前景进行综述。分析了这种基于内源性生物囊泡的策略在药物递送和疾病诊治中的优势和效果。finally,分析了当前研究的不足和未来的发展。相信该综述将开辟内源性生物囊泡在生物医学领域的应用,为当前的研究提供思路。

    将蛋白质包装到外泌体中虽然EXOtic系统允许将编码蛋白质的mRNA包装到外泌体中,但其他人已经开发出一种将未结合的诊疗性蛋白质加载到外泌体中的方法。CRY2是一种植物蛋白,在暴露于蓝光时会改变构象,而CIBN是CIB1的截短版本,CIB1是一种对处于激发态的CRY2具有亲和力的蛋白质。CIB1附着在外泌体标记CD9的胞质尾部,而CRY2附着在报告蛋白,例如mCherry和GFP。当生产细胞暴露在蓝光下时,这个名为EXPLOR的系统被证明可以通过与CIB1的可逆结合将cargo-CRY2加载到外泌体中。基于这个模型,Osteikoetxea等人测试了CRISPR相关核酸内切酶9(Cas9)蛋白是否可以加载到外泌体中,并将其与其他三种基于暴露于激huo刺激物后的异二聚化的类似加载系统进行比较。研究证明,装载CRY2-CIB1导致外泌体级分中的Cas9浓度比较高,达到每个外泌体超过20个Cas9分子。这项研究的一个值得注意的观察是数据表明,用于蛋白质货物输送的MysPalm工程似乎与工程化四跨膜蛋白标记(如CD9)相比更具优势。这种观察的两个可能原因是:1)结合结构域在与膜蛋白结合时可能无法在ER中正确折叠或2)它可能干扰CD9定位到外泌体膜中的天然位点。支持这一观点的观察结果表明,连在一起的Cas9活性only为WTCas9的30-50%。 免疫磁珠捕获法提取外泌体简单省时且分离纯度较高,可用于临床。

    间充质干细胞来源的外泌体(MSC-EVs)通过调节Mβ介导的血管生成为基础的诊疗已成为组织再生的有前途的策略。尽管如此,调整外泌体功能以诊疗肌腱损伤的方法仍然有限。我们通过应用生物活性玻璃(BG)增强的MSC-EV报告了一种新策略。BG诱导的外泌体(EVB)显示药用miRNA的上调,包括miR-199b-3p和miR-125a-5p,它们在M2巨噬细胞介导的血管生成中起关键作用。与幼稚的MSC-EV(EVN)相比,EVB通过重新编程的抗严M2巨噬细胞加速血管生成。在啮齿类动物跟腱断裂模型中,EVB局部给药通过M2极化激huo抗严反应,并导致M2肌腱与新形成的血管之间存在空间相关性。我们的结果表明,EVB在促进肌腱形成和减少有害形态变化而不引起异位骨化方面优于EVN。生物力学测试表明,EVB显着提高了修复肌腱的极限载荷、刚度和拉伸模量,同时M2/M1比值与生物力学特性呈正相关。基于重新编程再生微环境的增强性质,EVB具有相当大的潜力被开发为下一代诊疗方式,以增强功能再生以实现令人满意的肌腱再生。 可采取通过Nanosight 可视型纳米颗粒分析仪确定外泌体颗粒数。河北水果外泌体提取

外泌体复杂的内容物被认为是疾病诊断的无创或微创生物标志物。江苏水果外泌体wb检测

       外泌体是从缺乏血清的细胞或饮食受限的人体血浆中分离出来的,富含垃圾生物分子,包括错误折叠的蛋白质、氧化脂质和蛋白质。这些细胞废物可以被巨噬细胞吞噬,醉终在体内分解。抑制营养感应 mTORC1 信号会增加外泌体释放并延缓衰老,而 mTORC1 的组成型ji活会减少外泌体分泌并加剧体外和小鼠的衰老。值得注意的是,外泌体释放的抑制减弱了营养限制或雷帕霉素延迟的衰老,支持外泌体分泌在此过程中的关键作用。这项研究揭示了一种潜在的机制,通过这种机制,通过外泌体和巨噬细胞协调有害生物分子的处理,刺激的外泌体释放可以延迟多细胞生物体的衰**苏水果外泌体wb检测

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