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湖南体液外泌体western blot

来源: 发布时间:2023年01月30日

    外泌体是生物来源的膜结合纳米级囊泡,已知含有各种分子,例如蛋白质、脂质和核酸,它们有助于外泌体介导细胞间通讯的能力。人工纳米颗粒在药物输送中的醉新障碍,包括低细胞摄取、免疫系统激huo和组织障碍,已促使科学家将外泌体设计为药物输送载体。尽管外泌体具有稳定性、生物相容性、低免疫原性和跨越生物屏障的能力等固有特性,但仍需要开发能够将诊治材料有效装载到外泌体中的技术。在这里,我们介绍了一种简单的肽装备技术,可以在温和的装载环境中增强外泌体的货物装载潜力。具体而言,一种已知的细胞穿透肽YARA,源自人类免疫缺陷病毒-1转录反式激huo因子,与哺乳动物microRNAmiR-21-5p共价结合。然后将缀合物YARA-miR-21-5p与从间充质干细胞或ai细胞中分离出来的外泌体一起孵育,以进行加载。YARA-miR-21-5p的外泌体加载具有时间依赖性,并且通过孵育证明miR-21-5p的外泌体加载效率提高了倍。在有效的细胞摄取后,负载的外泌体迅速将YARA-miR-21-5p递送到哺乳动物细胞中。相对于未加载的外泌体和游离的YARA-miR-21-5p,加载的外泌体显着增强了人和小鼠成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭,这是伤口愈合的重要步骤。 干细胞外泌体对多种类型的免疫细胞均具有免疫调节作用。湖南体液外泌体western blot

    研究认为,在外泌体中可以发现少量的DNA,这种DNA可以对检测血清外泌体中CA相关突变有价值,外泌体中特定的miRNA或miRNA组可能在CA的检测中提供诊断或预后潜力。外泌体中的致ai和抑aimiRNA可能具有较高的诊断价值,因为它们在ai细胞和正常细胞之间的差异表达,可能增强它们在早期诊断中的有用性,致aiKras被报道在外泌体中差异富集miR-100,循环中外泌体miR-21升高与胶质母细胞瘤和胰腺ai、结直肠ai、结肠ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai和食管ai相关,尿源性外泌体miR-21升高与膀胱ai和前列腺ai相关。其他与多种CA类型相关的外泌体致aimicroRNA包括miR-155、miR-17-92簇和miR-1246。在脑、胰腺、结直肠、结肠、肝脏、乳腺、前列腺和食管ai;口腔鳞状细胞ai;以及淋巴瘤和白血病中观察到上调。tumour抑制miRNA,包括miR-146a和miR-34a,与肝脏、乳腺、结肠、胰腺和血液恶性tumour相关。 吉林胸水外泌体鉴定外泌体表面具有特定的蛋白标志物,其内含物也极为丰富。

Vlassov等人发表的一篇外泌体的提取方法及组成的专利文献中介绍,通过终浓度为8%的PEG6000与生物体液共孵育14h后,10000xg离心1h,可将直径在30-150nm之间,且包含丰富RNA的外泌体沉淀下来。因此采用终浓度为8%的PEG6000沉淀血清中的外泌体,为了进一步纯化胎盘相关外泌体,将获得的包含外泌体的沉淀用PBS重新悬浮后,加入非线性蔗糖密度梯度层,10000xg超速离心5h,将分层液采用PEG6000进行2次沉淀。经过多次实验反复验证,确定同时表达外泌体标志蛋白分子及胎盘特异性蛋白分子的胎盘来源外泌体所在密度层。

    间充质干细胞来源的外泌体(MSC-Exos)作为溃疡性结肠炎(UC)的潜在无细胞疗法而备受关注,这主要是由于其抗yan、组织修复和免疫调节特性。虽然静脉注射MSC-Exos能够在一定程度上改善UC,但口服外泌体是诊治UC等胃肠道疾病的优先方法。然而,外泌体含有易被胃肠道环境降解的蛋白质和核酸,使得口服给药难以实施。逐层(LbL)自组装技术为外泌体的口服递送提供了一种有前途的策略。因此,本研究构建了一个有效的LbL-Exos自组装系统,用于口服递送靶向结肠的外泌体以改善UC诊治。生物相容性和可生物降解的N-(2-羟基)丙基-3-三甲基铵壳聚糖氯化物(HTCC)和氧化魔芋葡甘聚糖(OKGM)多糖被用作外层以提供结肠靶向并保护外泌体免于降解。与普通外泌体类似,LbL-Exos具有相似的结构和特征,但LbL可在炎症结肠中控制释放外泌体。与静脉内给药相比,口服LbL-Exos可以使用一半数量的外泌体有效缓解UC。机制研究表明,LbL-Exos被巨噬细胞和肠上皮细胞内化,发挥抗yan和组织修复作用,从而减轻UC。此外,LbL-Exos系统能够通过抑制MAPK/NF-kB信号通路来改善UC。总的来说,我们的数据表明LbL-MSC-Exos可以在口服后缓解UC,因此可能构成未来UC诊治的新策略。 肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞(免疫细胞、神经细胞、干细胞),都可以产生并释放外泌体。

    醉近,细胞来源的纳米颗粒被称为细胞外囊泡(EV),在再生皮肤病学领域引起了相当大的兴趣。EV是一种有效的、可扩展的和稳定的生物因子来源,用于改善软组织质量,减少与baheng和烧伤等软组织损伤相关的患者发病率,改善再生医学美容领域中与组织衰老相关的美容结果。EV是由细胞自然产生的脂质包裹的纳米颗粒,参与蛋白质、RNA和代谢物等生物物质的细胞间转移。这些无处不在的纳米颗粒几乎由人体内的每一种细胞类型分泌,以自分泌、旁分泌和内分泌的方式作用,改变局部和远处受体细胞的功能。越来越多的证据表明EV在许多生理和再生过程中具有复杂和普遍的功能,包括干细胞维持、组织修复和免疫调节。EV的生物相容性、体内的长保留能力和跨越生物屏障能力,使它们成为再生医学中有吸引力的候选诊治物。 外泌体可以作为生物标志物来对疾病进行检测。山东腹膜透析液外泌体small RNA测序

外泌体参与炎症过程在许多病理状态中发挥作用,如ai症、炎症性肠病、Ⅱ型糖尿病、肥胖等。湖南体液外泌体western blot

外泌体作为药物或作为药物递送载体的诊治潜力正在被积极的探索。与脂质体相比,注射的外泌体可有效进入其他细胞,并可在小鼠外源性给药后以醉小的免疫清chu递送功能性分子。此外,外泌体的诊治应用前景广阔,因为它们已被证实耐受性良好。来源于间充质细胞及上皮细胞的外泌体在小鼠中重复注射时不会诱导毒性。MSC来源的外泌体已被提出是诊治本身,使用MSC来源的外泌体诊治移植物抗宿主病患者表明,重复注射耐受性良好,没有实质性副作用,未引起患者反应。湖南体液外泌体western blot

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