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北京动物组织外泌体

来源: 发布时间:2023年01月10日

自身免疫性疾病(ADs)是一组由免疫系统攻击自身organ或组织,导致免疫复合物形成和沉积的慢性炎症性结缔组织疾病,其病因和发病机制尚不明确,目前认为与遗传易感性、环境因素和免疫失调有关。外泌体是由脂质、蛋白质和核酸组成的球形脂质双分子层囊泡,通过囊泡转运系统传递信号分子调控靶细胞的功能和形态,从而参与细胞凋亡或增殖、细胞因子产生等多种生物学过程。近年来,大量研究表明外泌体主要通过调节靶细胞的功能来介导细胞间的通讯,促进ADs的发sheng发展。相反,得益于外泌体特殊的生物学特性,例如膜结合能力强,稳定性好,避免免疫排斥反应等,它还可以用作ADs的生物标志物和药物递送载体,在ADs的诊断和诊治中具有一定的应用价值。   支气管肺泡灌洗液中外泌体冷冻保存与新鲜样本相比, 体积变大且有一半以上种类蛋白质的丰度发生变化。北京动物组织外泌体

   在皮肤病学领域,研究表明外泌体在一系列炎症性皮肤病中起着重要的免疫调节作用,包括Psoriasis、特应性皮炎、扁平苔藓、大疱性类天疱疮、系统性红斑狼疮等。由于这些疾病的复杂性,醉近的大多数研究试图更好地理解EV在这些病理中的功能,并阐明它们作为未来生物标志物的潜力,包括预测炎症性皮肤病的发病,以及复发或对药物的反应。对于外泌体在再生皮肤病学发展及相关商业前景,外泌体已被证明具有免疫调节作用,调节细胞衰老并诱导血管生成和从头合成胶原蛋白。通过操纵细胞培养环境和亲本细胞,人们增强了来自间充质干细胞和其他细胞类型的EV的自然促再生效应。这可以通过低氧调节、酸中毒或炎症细胞因子孵育来实现。植物茎组织外泌体提取循环外泌体PD-L1有望成为一种新的PD-1抑制剂免疫zhiliao疗效预测标志物。

在利用外泌体运输PTX进行抗中流的研究中,由于间充质干细胞可以归巢(homing)至中流细胞微环境并且可以不通过基因操作即可对PTX运输,因此Pessina等采用间充质干细胞SR4987作为分泌外泌体的母代细胞,而后将SR4987与PTX共混,使SR4987分泌的外泌体含有PTX,再利用超速离心法将载有PTX的外泌体分离出来,研究其对体外人胰腺ai细胞株的影响。结果表明外泌体可以有效的运载PTX并不破坏其功能,小泡(主要指外泌体)溶液的蛋白质浓度在0.047~0.095mg/mL之间时可以诱导中流细胞凋亡50%,这种抑制效果与纯PTX对体外ai细胞的抑制效果相当。

目前为止已鉴别了2500余种miRNAs分子。例如,血液外泌体miR-21的升高已被证实与胰腺ai、结直肠ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多种中流相关,可能与其参与中流xue管生成有关,研究表明肺ai细胞释放的外泌体miR-21会通过STAT3依赖机制诱导周围支气管细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的产生,从而促进血管生成。在食管ai中,miR-21还可以反映中流的恶性程度,食管ai患者的miR-21水平与良性中流患者相比急剧上升,上升的miR-21水平也与中流的淋巴侵袭和转移相关。在膀胱ai患者中,尿液中的miR-21和miR-4454会明显上调。外泌体被认为是一种合适的药物传递系统,因为蛋白质和遗传物质都可以装载到其中。

研究采用蔗糖密度梯度离心联合2次PEG6000沉淀,极大地降低了外泌体的提取成本,且获得的外泌体不仅表达外泌体公认的标志蛋白分子,同时也表达胎盘特异性蛋白分子,证明通过这种方法获得的外泌体是胎盘来源外泌体。通过蔗糖密度梯度离心后得到的外泌体沉淀经蛋白质SDS-PAGE胶电泳,银染后可见各蛋白分子条带清晰可见,动态光散射分析粒径,结果显示获得的外泌体颗粒粒径大部分分布于28-91nm之间,与文献报道外泌体颗粒大小相一致。胎盘外泌体经过PKH67荧光染料染色后,与细胞共孵育,荧光显微镜下观察外泌体具备进入细胞的活性,进一步验证了我们应用此种改良的分离方法可有效的获得胎盘来源的外泌体。本研究通过蔗糖密度梯度离心联合2次PEG6000沉淀成功分离得到母体血清中胎盘来源外泌体,并从蛋白标志分子、电镜、粒径及分布、进入细胞活性四方面对其进行了鉴定,为研究妊娠期间胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘源性并发症中的作用奠定了基础。外泌体内的miRNA、lncRNA和cirRNA表达低,检测难度大。河北植物组织外泌体鉴定

流式细胞分选法纯度高,能特异性分选某种细胞来源的外泌体,不适于大体积样本的分选。北京动物组织外泌体

外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断, 是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡, 且有较长的循环半衰期, 可用于免疫学相关研究, 同时, 源自ai细胞的外泌体可以被工程化, 发挥免疫刺激作用, 可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外, 外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中, 具有低免疫原性、高耐受性等特点, 且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障, 因此可用作组织和qi官特异药物输送系统, 兼有高输送效率和低副作用。因此, 外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质, 运送至靶位点后实现靶向zhiliao。北京动物组织外泌体

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