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河北外泌体透射电镜检测

来源: 发布时间:2022年12月06日

由于卵巢中流细胞质膜上的磷脂酰丝氨酸(phosphati[1]dylserine,PS)可以外泌体形式分泌入血,恶性卵巢ai患者血浆外泌体中的PS水平明显高于卵巢良xing病变患者和健康对照者,因此外泌体中的PS可用于协助早期卵巢恶性中流的筛查和诊断。外泌体可穿透血-脑脊液屏障的特点也为脑中流患者提供了早期诊断的重要工具。血浆微囊泡EGFRvIII mRNA已被证明可作为胶质母细胞瘤患者诊断的支持证据。2020年,David Lyden和William R. Jarnagin教授团队合作,通过探究来自不同ai种组织、血浆和其他体液的426个人类样品中细胞外囊泡和颗粒(extracellular vesicle and particle,EVP)的蛋白质组学特征,鉴定出一批中流特异性血浆EVP蛋白(特异度和灵敏度分别为95%和90%),并可区分患者的中流类型,使基于外泌体的中流诊断和鉴别诊断向前迈进了一步。干细胞外泌体具有减少细胞凋亡、减轻炎症反应、促进血管生成等功能。河北外泌体透射电镜检测

为获得外泌体的大小、浓度、形态及蛋白质组成等信息,可以通过电镜、动态光散射、纳米颗粒跟踪分析仪、蛋白质免疫印迹、酶联免疫吸附法、流式细胞仪等对外泌体进行表征。通过电镜可获得外泌体的形态信息,不同类型的显微镜由于操作环境不同,得到的外泌体形态存在差异。例如,在扫描电镜、透射电镜和原子力显微镜中,外泌体呈现囊泡独有的茶托形,可能由于样品在固定或染色过程中极度脱水,导致外泌体塌陷所致。与之相反,在冷冻电镜中外泌体呈现圆形,由于不会脱水变性,所得的外泌体形态可能更加接近囊泡的真实状态。另外,由于透射电镜和原子力显微镜具有较高分辨率,也能够提供外泌体磷脂双分子层厚度、粒径分布等信息。广东动物组织外泌体NTAmiRNA是中流外泌体检测中较常见的标志物。

外泌体是细胞间信息传递的重要“信使”, 可通过三种方式介导细胞通讯: (1) 外泌体以旁分泌的方式与靶细胞相互作用, 通过受体–配体作用黏附到靶细胞表面, 随后被内吞入靶细胞, 或直接将内容物释放到靶细胞内, 从而激huo靶细胞; (2) 外泌体的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割, 产生的片段可以与靶细胞的细胞表面受体结合, 从而激huo靶细胞; (3) 外泌体还可以与靶细胞直接接触发生膜融合, 导致外泌体中的蛋白和核酸非选择性转移到目标细胞, 从而引起靶细胞的响应。通过介导细胞间的通讯, 外泌体不jin能够参与多种生理过程, 比如消除胞内陈旧分子、呈递抗原、分化调节性T淋巴细胞或髓样细胞以抑制免疫反应, 而且还可以参与疾病形成的病理过程, 如通过与受体细胞的相互作用传播病原物质、促进中流转移过程中的血管生长和中流细胞迁移。

外泌体是具有双层脂膜的囊泡结构, 其稳定性较好, 可保护内部生物分子免受体液中各种酶的影响, 从而保持其完整性和生物活性。外泌体被提取后一般悬浮于磷酸盐缓冲液。目前, 常用的储存方法为冷冻保存, 但是冷冻保存可能会导致外泌体形状与物理性质的改变, 也可能导致多层囊泡的形成和聚集, 反复冻融会导致外泌体表面分子的生物特性、含量和标志物组成发生变化。血清中包含外泌体在内的细胞外囊泡DNA在不同储存环境可保持稳定, 血浆存放于4 °C时其RNA会明显降解, 在–20 °C下长期保存也会导致血浆中外泌体总RNA降解, 但miRNA却十分稳定, 这也提示了外泌体miRNA作为生物标志物的潜力。多种细胞分泌外泌体,如MSCs、上皮细胞、巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞、神经元细胞、中流细胞等。

除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。研究表明,在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分离出来的外泌体含有中流细胞特异性的mRNA,而被爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感ran的细胞分泌的外泌体中也含有EBV的潜伏期mRNA。因而,外泌体的这种运载mRNA的能力引起了中流研究者们的注意。近期,Saydam等率先报道了利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染,使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP,其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处,并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神经鞘瘤的增长被明显抑制。来源于ai细胞的外泌体对自然杀伤细胞具有细胞毒性作用。浙江植物茎组织外泌体透射电镜检测

外泌体特主要来源于细胞内多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。河北外泌体透射电镜检测

外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断, 是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡, 且有较长的循环半衰期, 可用于免疫学相关研究, 同时, 源自ai细胞的外泌体可以被工程化, 发挥免疫刺激作用, 可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外, 外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中, 具有低免疫原性、高耐受性等特点, 且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障, 因此可用作组织和qi官特异药物输送系统, 兼有高输送效率和低副作用。因此, 外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质, 运送至靶位点后实现靶向zhiliao。河北外泌体透射电镜检测

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