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上海外泌体染色

来源: 发布时间:2021年11月27日

外泌体在神经系统中与神经回路的控制相关,同时各种神经退行性疾病的致病蛋白还可以通过外泌体释放到细胞外并传递到其他细胞,与病情发展密切相关。 病细胞释放的外泌体含有许多与血管新生和免疫逃逸相关的分子,构建适合病细胞生长的微环境,促进病细胞的发展。另外,病细胞来源的外泌体上粘着分子的表达形式决定着症状向身体部位的转移途径。近,有报告指出脂肪细胞释放的外泌体对肝脏的遗传基因表达有控制作用。许多病毒利用外泌体的产生路径传播细胞,受病毒传播的细菌和寄生虫通过外泌体控制其他受细胞传播的细菌、寄生虫的活动。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体。上海外泌体染色

全自动外泌体荧光检测分析系统的基本原理是一种基于特异性免疫捕获技术,允许研究者直接分析特定群体的外泌体或外囊泡。通过配套的试剂盒,客户一次性能够分析多达9个不同的样本,很大节省了时间和经济成本。全自动外泌体荧光检测分析系统兼容各种生物样本,除了纯化的外泌体之外,对于血液、尿液、腹水中的外泌体也可直接检测分析,很大拓展了研究范围。全自动的可对单个外泌体进行表征分析的全新设备。该设备能够提供全部的外泌体表征信息,包括外泌体粒径大小、计数、分布、携带蛋白表达、生物标志物(CD9,CD81,CD63等)共定位等。操作简单,结果可靠。一经推出,便引起了外泌体领域科研工作者的普遍关注,短短两年时间在全球已有50多个实验室采用该技术,发表重要文献近百篇。鼻腔灌洗液外泌体NTA从症状患者树突状细胞释放的外泌体中,含有各种症状细胞来源的蛋白质。

外泌体的提取主要包括以下几种方式:一是超速离心法,这是目前外泌体提取常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足,电镜鉴定时发现外泌体聚集成块, 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准,也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。二是过滤离心, 这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性 ,但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法, 用此种方法分离到 的外泌体纯度 高,但是前期准备工作繁杂,耗时,量少。

在20世纪80年代,外泌体被描述为从网织红细胞分泌的内体来源的囊泡。人们对这些细胞外囊泡的兴趣逐渐增加,因为它们似乎参与了很多细胞过程。外泌体携带蛋白质、脂质和RNAs,介导体内不同细胞类型之间的细胞间通讯,从而影响正常和病理状态。只有近,科学家才认识到将外泌体与其他类型的细胞外囊泡分开的困难,这排除了特定功能对不同类型分泌的囊泡的明确归因。为了阐明这个复杂但正在发展的科学领域,该综述着重于外泌体和其他分泌的细胞外囊泡的定义。讨论了它们的生物发生,分泌及其后续的命运,因为它们的功能依赖于这些重要过程。外泌体分析会引起何种生理作用,这是进一步研究的发展方向。

为了解决外泌体实验遇到的上述的各种问题, Wako 研发出MagCapture™外泌体提取试剂盒PS(MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS)提取高纯度细胞外囊泡。外泌体膜含有分泌细胞源的蛋白和脂质,众所周知磷脂酰丝氨酸(PS)在活细胞通过翻转酶作用导向细胞膜内侧,暴露在外泌体膜外侧3)。另外,T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing protein 4(Tim4 通过巨噬细胞进行细胞凋亡的吞噬受体)蛋白通过细胞外域IgV域与含有钙离子的PS结合4)。基于上述知识,我们利用Tim4固化磁珠,在钙离子存在下捕捉培养上清和血清等样品中的外泌体,再添加螯合剂洗脱外泌体,这种外泌体纯化方法是和金泽大学医学系免疫学华山教授共同开发,并取得了成功。5)这是迄今为止取代黄金标准超速离心法的新型外泌体纯化方法。类风湿关节炎患者的滑膜成纤维细胞所释放的外泌体。北京外泌体miRNA测序

外泌体膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。上海外泌体染色

所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。 有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白,是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合,有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现在早期以及回收的核内体中,RAB7 和 RAB9主要出现在晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。上海外泌体染色