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特异性等位基因扩增等位基因特异性扩增法（allele- specific amplificarion,ASA） 是基于PCR技术的一种单核苷酸突变检测法，是分析已知碱基替代或微小片段缺失和插入型突变的常规技术。在PCR 的引物设计中，根据已知突变位点性质在引物3 ' 端或中间设计一错配碱基，使之*能与突变型或野生型基因互补而只扩增突变型或野生型基因。ASA技术只需一步PCR反应，甚至无需电泳和标记技术。因其快速，重复性强，耗资少，无同位素污染以及高效性等特点，将成为有前途的适应于人群大规模突变筛查的方法。应用该方法比较好避免错配碱基为G: T，这种错配可能引发扩增反应。基因在表达其性状的过程中贯串着核酸与核酸、核酸与蛋白质的相互作用。徐汇区耐热分子生物学量大从优

PCR- SSCP 技术凭借突变可引起单链DNA三级构象改变,通过观察单链DNA在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率漂移来判断突变。样品经PCR 扩增后，其产物经变性后可以产生2 条单链，如果存在基因突变，哪怕是一个碱基的异常，单链的构象也会发生变化，正常与突变的DNA单链在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 中，可以显现出不同的带型，从而确定野生型和突变型，PCR- SSCP 分析的主要优点是简易且敏感性较高。但是该技术不能确定突变的部位和性质。PCR- SSCP 突变检测敏感性随PCR 产物长度的增加而降低，一般用于检测较小外显子的突变。有时由于单个核苷酸变化所引起的构象改变很小，用PAGE 电泳就可能无法检出，在PCR 产物或待测DNA 小于200 bp 时，PCR- SSCP 分析能够检测出70%~ 95%的突变。如果以毛细管电泳代替PAGE，则可大为提高突变检测的效率。黄浦区绿色分子生物学推荐货源1953年F.Sanger利用纸电泳及色谱技术完成了胰岛素的氨基酸序列的测定，开创了蛋白质序列分析的先河。

③分子生物学研究的主要目的是在分子水平上阐明整个生物界所共同具有的基本特征，即生命现象的本质；而研究某一特定生物体或某一种生物体内的某一特定***的物理、化学现象或变化，则属于生物物理学或生物化学的范畴。生物化学是生物学的分支学科，是研究生命物质的化学组成、结构及生命活动过程中各种化学变化的基础生命科学。分子生物学是在分子水平上研究生命现象的科学，通过研究生物分子的结构、功能和生物合成等方面来阐明生命现象的本质。

变性- 高压液相色谱分析变性- 高压液相色谱（denaturing high- performance liquid chromatography,DHPLC） 是利用DNA构型改变检测基因突变和遗传多态性的方法之一，其可以检测单核苷酸多态和可遗传的突变。实验主要过程包括PCR 扩增待测和正常DNA样品，将扩增产物变性后再复性，若存在突变，在这一复性过程中可形成异源双链。在部分变性条件下，高压液相色谱分析可以有效地区分由变异碱基与正常碱基形成的异源DNA双链和正常DNA双链。由于DHPLC 的分辨率可达到1bp/ kb，而且操作过程可以全部程序化、大规模化和自动化，使得实验时间**缩短，实验准确率提高，可作为大群体任何基因突变初筛的有力手段，比SSCP 有更多的优越性，具有广泛的应用前景，许多工作都已经证实了DHPLC的敏感性、有效性和准确性。有些蛋白质分子是由相同的或不同的亚单位组装成的，亚单位间的相互关系为四级结构。

两个DNA分子可以在酶的催化下连接起来。因此,任何DNA的限制性片段都能插入到一个载体DNA分子中(通常是质粒DNA分子),这样,就形成了重组DNA分子,将重组DNA分子引入到合适的细胞群体中之后(常见为细菌),带有特定重组DNA分子的细胞可被挑选出来。这一过程称之为目的DNA片段的克隆。由此,我们可以制备出无限量的特定DNA分子。随着技术的发展,能够利用化学方法在机器上自动合成长度达100碱基的DNA寡聚核苷酸。因此,人们不仅能够制造出含有天然DNA的重组DNA分子,而且也能够将经过突变的或人工合成的DNA分子插入到载体分子中。分子生物学（molecular biology)是从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学。长宁区附近分子生物学推荐货源

1958年Crick在此基础上提出的中心法则，描述了遗传信息从基因到蛋白质结构的流动。徐汇区耐热分子生物学量大从优

随着基因工程的蓬勃兴起而首先受益的产业领域就是制药工业。现已有些多肽或蛋白质药物，如人胰岛素、生长***、干扰素等能够通过“工程菌”大量生产，更多的药物则正在开发之中。疫苗的研制正在极大地促进预防医学的发展，例如，乙型肝炎疫苗、非甲非乙肝炎疫苗、轮状病毒疫苗、疟疾疫苗等等，有些已能付诸应用，有些尚在开发之中。通过蛋白质工程技术，采用定点突变的方法，还可望制造出新型的蛋白质。例如，白细胞介素 2和β干扰素是两种具有***作用的蛋白质，在其多肽链中各有三个半胱氨酸残基，但只形成一对二硫键，由于分子中含有多余的一个半胱氨酸残基，所以二个分子容易缔结合成二聚体而失活，用定点突变法改变半胱氨酸的密码子为丝氨酸密码子，就可防止二聚体的形成，从而在不损害活性的情况下**延长这两个蛋白质的半衰期，提高了疗效。徐汇区耐热分子生物学量大从优

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