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重庆PanoCell单细胞测序服务机构

来源: 发布时间:2022年06月02日

基于桥式PCR技术的簇生成可以将模版链迅速扩增成千上万倍,保证过程中足够的测序深度。测序时使用特殊标记的dNTP:1)碱基上通过敏感键修饰上不同的荧光基团,用于区分ATCG;2)3'端使用叠氮基团封闭,保证一次循环只上一个dNTP。每一轮循环结束时,会通过高速荧光显微镜记录荧光图像,再通入试剂除去荧光基团和叠氮基团,开启下一循环。通过分析读取同一位点的荧光,实时获取模版链的碱基序列。由于过程中使用的化学反应并不可控,随着循环数的增大会出现不同步的情况,因此Illumina的读长只能限制在200bp左右。经验丰富的实验团队,为获得示组织内真实表达水平的高质量冷冻切片提供硬件和技术保障。重庆PanoCell单细胞测序服务机构

基于10X Next GEM技术,单细胞免疫组库测序一次实验可以同时检测近万个细胞,可在一个样本中同时获5'端mRNA表达谱、TCR和BCR的信息,结合基因的表达谱和V(D)J数据进行复杂组织样本的是影响免疫应答分析,监测免疫疗法的效果,研究疾病发生、发展的分子机制。 烈冰平台 1/ 1000+ TCR/BCR项目经验,一次实验可同时获取1000-10000个细胞的文库构建,获得转录组和免疫组数据。 2/ 具备完善的免疫组库测序和实验质控流程,获取V(D)J全长序列的配对信息 3/ 丰富的免疫组库测序和数据分析经验,实现专属个性化数据分析服务,搭配单细胞分析云平台,一键导出交互性的动态结果报告。成都RNA测序平台烈冰对于一个细胞群体中的每个细胞单独进行建库测序分析。

二代测序技术在测序方法上取得了重大突破,基于“边合成边测序”(sequencing by synthesis)和大规模平行测序技术(massive parallel analysis,MPS),使测序通量和读取速度得到极大提升,烈冰生物斥巨资购置的Novaseq6000测序仪的测序原理可以简化为四步:样品文库构建、簇生成、测序和数据分析。由于读长限制,样品DNA或由RNA逆转录得到的cDNA需要被打断成300-500bp的片段,并在3'和5'端接上3种序列:1)Index,用于区分样品来源;2)Adapter,用于结合测序通道上的位点;3)Primer binding site,用于结合PCR引物启动扩增反应。

多样本数据合并:Fraction of Reads Kept:合并样本时,各样本根据Mapped Barcoded Reads per Cell数量计算出来的数据利用率。如果各样本间该参数值相差很大,需要进行Downsample处理,以数据量少的样本为基准将不同样本中细胞测序深度标化到同一水平,从而避免因测序深度差异导致的基因检测数量、基因表达水平的差异。烈冰科技自主研发的单细胞云平台致力于帮助每一位客户定制化分析数据,深入解读数据分析结果,深入挖掘其背后的生物学意义;从操作便捷、结果可视化、分析可追溯、系统稳定等方面助力单细胞研究,加速科研进程!烈冰实验室包含从样本处理到测序下机的全套实验平台。

烈冰生物生信分析团队紧追国际前沿、整合添加多项国际期刊认可的空转分析工具,构建一套完整的数据分析流程;精心研发空转结果浏览器,可同步展示空间转录组与单细胞测序分析结果,详细深入地解析空间转录组数据。完成从Raw data(原始数据)到Spot-Gene的具有定位信息的表达矩阵的过程后,就进入了空转的第二步,去进行Spot的Cluster的过程,熟悉单细胞测序的研究者知道,Cluster在单细胞测序中往往表示为细胞的类型,也就是说能聚在一起采用算法分为一个群体细胞是一个Celltype(当然分情况也会有不同)。而在空转中,也正是由于前面提到了细胞的非单一性,导致了这里的分群并不是单纯的同一细胞类型,而应该认为是具有相同细胞组成的点阵区域,或者说是近似的组织结构区域。空间转录组可展示组织切片中不同区域的基因表达情况,揭示精细病理区域的信号通路。温州单细胞测序技术支持

烈冰科技成立10余年,为科研学者提供专注的测序数据分析服务。重庆PanoCell单细胞测序服务机构

当蜂巢孔内同时落入细胞和磁珠后,接下去可以往BD Cartridge板中加入细胞裂解液对细胞进行裂解,使细胞内的RNA与磁珠上的标签进行结合,完成每个细胞内RNA的捕获和标记。这时,再将捕获了RNA的磁珠进行回收,待所有质控结果确认通过后就可以进行后续的RNA反转录、cDNA第二链合成等实验操作。而BD Cartridge板则需要再进行一次成像,获得磁珠收集后的扫描图,判断磁珠是否已经被有效收集。根据每一步的质控结果,烈冰科技(NovelBio)单细胞测序实验团队会根据单细胞分选的实验结果生成实验总结报告,判断每一步骤是否通过质控,并得到捕获的单细胞数量以及双细胞比例,对整个实验进行总结评估。若所有过程通过质控,实验样本即可进行下一步实验操作。重庆PanoCell单细胞测序服务机构

上海烈冰生物医药科技有限公司致力于医药健康,以科技创新实现高品质管理的追求。烈冰生物作为生物科技、医药科技、信息科技、计算机科技领域内的技术开发、技术服务、技术转让、技术咨询,市场营销策划,市场信息咨询与调查(不得从事社会调查、社会调研、民意调查、民意测验),从事货物及技术的进出口业务,计算机、软件及耗材(除专控),软件开发【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的企业之一,为客户提供良好的单细胞测序,生物大数据云分析平台,空间转录组测序,单细胞多组学测序。烈冰生物继续坚定不移地走高质量发展道路,既要实现基本面稳定增长,又要聚焦关键领域,实现转型再突破。烈冰生物创始人陈岱,始终关注客户,创新科技,竭诚为客户提供良好的服务。

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