上海正规鼠尾胶原厂家供应

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：胶原蛋白具有抗氧化作用，但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建，对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2诱导。24 h后，以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态，应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率，TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态，流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平，Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底铺上一层氯仿。上海正规鼠尾胶原厂家供应

鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理，收集上清液；在冰水浴中，用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，调节pH = 6.5，用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。厦门鼠尾胶原单价鼠尾胶原醋酸溶解：将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中。

要准备的器具：组织剪2把，有齿镊1把，无齿镊1把，200 ml烧杯1个，培养皿1个，带盖广口瓶1个，离心管、小瓶数个，滴管若干。以上物品须经严格高压消毒灭菌。需配制的液体0.1％醋酸溶液。经44.48N10 min高压蒸汽灭菌(或是过滤除菌)后备用。此外还有用消毒双蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴，洗净，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴，用止血钳夹住尾巴较高，折断尾骨后拉出尾腱，将尾腱剪碎后置消毒的三角烧瓶中，称尾腱的重量，按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液，摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48 小时，离心。吸取其上清，分装至小瓶，4℃保存。上述制备过程均在无菌条件下完成。

鼠尾Ⅰ型胶原：组装液的配置：1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化钾 100 mL，用1 mol/L 氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中，倒入0.5 mL自组装液，室温放置20 min。予自组装液自组装24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培养皿中，将自组装24 h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10 mmol/L 二水氯化钙+150 mmol/L氯化钠+50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中，滴入聚丙烯(PAA)至浓度350 μg/mL；滴加1 mol/L的氯化氢，调节酸碱度至7.4，然后缓慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氢二钠)，约16滴/min。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。

鼠尾胶原是一种天然培养基，它具有促进体外培养细胞（特别是上皮细胞）贴壁的作用，同时它也是一种天然的黏附剂，当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬 片时，可在瓶底涂一层胶原，再放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通 过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法，以及如何切割小玻片，并利用鼠尾胶原将其固定于 培养瓶内。 实验设备及材料： 大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理 盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容： 1、制备鼠尾胶原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。鼠尾胶原是一种天然培养基，它具有促进体外培养细胞（特别是上皮细胞）贴壁的作用。开封正规鼠尾胶原报价

胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同。上海正规鼠尾胶原厂家供应

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等 步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿，培养一些在普通细胞 培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶，模拟真实的生长环境， 使细胞在三维环境中生长。 1，在使用鼠胶原蛋白 型包被的细胞培养皿中检查到PC-12 细胞的 贴壁和生长。 1mg/ml浓度以上，pH 左右时可形成具有一定强度的三维胶，检查到 NIH-3T3 细胞在三维胶内正常生长、PC-12 细胞在三维胶表面 正常生长。 使用方法： 1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm 0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。上海正规鼠尾胶原厂家供应