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常熟哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

来源: 发布时间:2022年11月25日

胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。功能:牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他元素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到消毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。需要长期保存的胎牛血清须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。常熟哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

胎牛血清的保存方法:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。海门MEM胎牛血清蛋白和脂类含量低,表现为稀薄、清淡。

血清是细胞培养过程中常用的生物试剂,市面上有很多种类的血清,现在就来给大家介绍其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法,过滤去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黄嘌呤和胸腺核苷等、胆固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的细胞实验,比如:需要避免细胞培养基中一些小分子干扰的实验。使用放射性标记小分子,对生物合成过程进行监测,以研究蛋白质等大分子的生化性质、合成、加工、细胞内传送、分泌和降解过程。这时,常将细胞放在含有充足养分和放射性标记氨基酸(如35S标记的蛋氨酸或半胱氨酸)的培养液中进行标记。为避免外源未标记的氨基酸的干扰,这时所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基础培养基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。

胎牛血清作为细胞生长不可缺少的重要营养来源一直备受科研人员重视,那么胎牛血清在参与细胞培养实验都发挥着什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能:提供维持细胞指数生长的元素、基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。胎牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。

不少小伙伴对于血清的挑选、使用和储存等方面,都有不少疑惑,我们汇总了一些常见问题,并且针对这些问题,给出了相应的建议供大家参考。先来看看关于血清挑选的部分:如何挑选胎牛血清?1、胎牛血清的标准采集血液时间是5-8月龄的未出生胎牛。2、选购时询问是否有检测报告,并注意检测报告中的各类指标。3、注意血清有效期,尽量不买过期血清。4、留心观察相关人员是否专业:血清是否全程冷链运输;是否严格储存在-20℃冰箱中;工作人员对待血清态度如何;能否提供同一批次血清。真正的胎牛血清凝血功容易破裂。徐州DMEM/F12

胎牛血清极低内有害元素,达到特级标准,使细胞更健康,实验更顺利。常熟哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

胎牛血清、新生牛血清、小牛血清区别三者之间的区别:1、采集血液时间不同,胎牛血清(FetalBovineSerum)是在母牛怀孕5-8个月时,通过胎牛心脏穿刺采集血液获取的血清。新生牛血清(NewbornCalfSerum)是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清(CalfSerum)采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。2、组份与比例不同,两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、元素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。用途与用法不同,某些细胞必需胎牛血清才能生长,而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%,有特殊要求的浓度在20%。常熟哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

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