依氏假交替单胞菌

大肠杆菌的耐药可以是天然固有的，也可以通过后天的基因突变、基因转移获得。固有耐药性(intrinsicresistance)，即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在，而是细菌细胞所固有的，与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。获得性耐药(acquiredresis—tance)是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变，或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。就目前的研究现状来看，大肠杆菌的耐药性机制主要有5种：①抗s素作用位点的改变或新作用位点的产生。②酶对抗s素的修饰和破坏。③增加抗s素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用。④细菌外膜通透性的改变。⑤质粒介导的耐药性。一种耐药机制可以对多种抗s素表现为抗性，同一种抗s素也常常出现多种耐药性机制共同抑制的现象。大肠杆菌表达系统的组成：表达载体、外源基因、表达宿主菌。依氏假交替单胞菌

悬液保存法是铜绿假单胞菌混悬于适当溶液中进行保存的方法，蒸馏水保存法将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。糖液保存法将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。载体保存法将铜绿假单胞菌吸附在适当载体上进行干燥保存的方法，土壤保存法主要用于能形成孢子或孢囊的铜绿假单胞菌菌种的保藏。方法是在灭菌的土壤中加入菌液，立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥，然后冷藏或在室温下密封保存。保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜，土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。天鹅颈状弯曲担子酵母菌株铜绿假单胞菌中的O抗原可用以分型。

如何认识金黄色葡萄球菌？根据色素、生化反应等表型分类：按照传统分类，葡萄群菌包括30多个钟。其中金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌3个钟分别表示了致病菌、正常菌群或机会致病菌以及非致病性葡萄球菌。金黄色葡萄球菌的毒力因子包括：1.细菌的一些表面结构蛋白，如粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖和SPA等；2.酶：凝固酶和其他酶（纤维蛋白溶酶、透明质酸酶等）；3.有害元素：溶素、杀白细胞素、肠有害元素等。侵袭性疾病（化脓性传染）：1.皮肤化脓性传染，脓汁金黄而黏稠、病灶界限清楚，多为局限性；2.各种部位的化脓性传染，如气管炎，肺炎，中耳炎等；3.全身传染，若皮肤原发化脓灶受到外界挤压或机体抵抗力下降，则会引起败血症，脓毒血症等。

大肠杆菌表达系统的组成：（一）表达载体：一个完整的质粒载体需要有：复制起点、启动子、插入的目的基因、筛选标记以及终止子。（二）外源基因：在大肠杆菌表达体系中要表达的基因即外源基因，包括原核基因和真核基因。原核基因可以在大肠杆菌中直接表达，但是真核基因含有内含子，大肠杆菌不能对mRNA进行剪切，从而真核基因一般以cDNA的形式在大肠杆菌表达系统中表达。目的蛋白在大肠杆菌系统表达中的形式有二种。一种是在细胞内表现为不溶性的包涵体颗粒。另一种是在细胞内表现为可溶性的蛋白质。可溶性的目标蛋白质除可存在于细胞质中外，还可借助于本身的功能序列和大肠杆菌蛋白质加工、运输体系，至终分泌到周质空间，或外泌到培养液中。（三）宿主细胞：大肠杆菌蛋白表达过程中很重要的因素就是宿主细胞的选择。对于宿主细胞的选择主要根据宿主细胞各自的特征及目的蛋白的特性。对于是适合目的基因表达的宿主细胞主要有以下要求：①容易获得较高浓度的细胞。②能利用易得廉价原料。③不致病、不产生内毒。④发热量低、需氧低、适当的发酵温度和细胞形态。⑤容易进行代谢调控。金黄色葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。

大肠杆菌包涵体蛋白复性：重组基因在表达宿主中表达量过高或合成速度过快，以至于没有足够的时间进行折叠，二硫键不能正确配对，导致蛋白以包涵体的形式存在。导致包涵体形成的主要原因有以下几点：1、重组蛋白的氨基酸组成，一般说来含硫氨基酸越多越容易形成包涵体。2、重组蛋白所处的环境：诱导温度高或胞内pH接近蛋白的等电点时容易形成包涵体。3、重组蛋白是大肠杆菌(Escherichiacoli)的异源蛋白，由于缺少真核生物中翻译后修饰所需酶类，致使中间体大量积累，容易形成包涵体沉淀。4、丰富的培养基有利于活性蛋白质的表达，当培养条件不佳时，容易形成包涵体。枯草芽孢杆菌能够分泌促进作物生长的活性物质，使植株叶片浓绿肥厚，提高作物免疫的能力。嗜盐速生杆菌菌株

枯草芽孢杆菌在发酵过程中能产生多种氨基酸，对作物有生长调节的作用。依氏假交替单胞菌

尽管枯草芽孢杆菌在应用过程中还存在一些问题，但枯草芽孢杆菌杀菌剂具有对人畜相对安全、环境兼容性好、不易产生抗药性等优点，因而更符合现代社会对农业生产及有害生物综合防治的要求，而且枯草芽孢杆菌抗类菌物质的分离纯化及抗类菌作用的分子机制、拮抗基因的克隆及其表达调控等研究也已经积累了丰富的研究资料，具有重要的理论意义和指导生产价值。目前的枯草芽孢杆菌相关制剂，主要贸易剂型为微囊粒剂和可湿性粉剂。枯草芽孢杆菌可与其它拮抗类菌混合使用，实现多种抗生菌功能互补、多种病害兼防、作用持久的协同防治的效果。有很广的发展潜力。依氏假交替单胞菌

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