安徽10K超滤离心管使用方法

超滤是大分子脱盐、浓缩较方便的方法，重复性好，得率有保障，已经在蛋白、抗体、病毒、核酸、囊泡等样品制备中建立标准操作；在目前大热的外泌体制备中也已经成为主流方法。超滤管采用离心方式快速处理样品，是很多科研小伙伴们每天要用到的基本装备。但是，在默克生命科学团队推出超滤管中文说明书(AU0.5/4/15)之前，我们发现近90%的使用者在选择和使用过程中因为缺乏必要信息而没有获得较佳体验，更重要的是，宝贵的样本会遭受本可避免的损失！如果目的蛋白是120kDa，请问应该选择的超滤管规格是100k，50k，还是30k甚至10k？你采用的是1/2，1/3抑或1/6算法？这些没有统一的说法，是因为不同厂家的膜的截留分子量的定义不同。超滤离心管的选择需要根据被过滤溶液或混合物的性质和所需的纯度和体积来确定。安徽10K超滤离心管使用方法

脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成，具体过程是浓缩样本，弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行，直到杂质的浓度被充分降低。关于超滤管的常见问题与解答：Q:超滤管的膜材质是什么?A:超滤管的膜材质为默克密理博特有的Ultracel再生纤维素膜，生产工艺严格,截留分子量明确而准， 蛋白吸附损失小。Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少?A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。广东10K超滤离心管超滤离心管可以用于提取土壤样本中的微生物和有机化合物，以研究土壤生态系统。

超滤离心管使用注意事项：当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。

超滤离心管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强，对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，也可以尝试换成Amicon Ultra0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析，可用缓冲液或Milli-Q水预清洗。如果干扰仍存在，用0.1N NaOH清洗，然后用缓冲液或Milli-Q水再次清洗后甩干。超滤离心管可以用于制备溶液中的化合物和分子，以进行进一步的纯化和鉴定。

超滤离心管具有快速超滤功能，能够达到较高的浓缩倍数，轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理，获得较高样本回收率(通常>90%),并达到30倍的浓缩。产品特点：超滤离心管设计用于体外诊断，包括分析浓缩血清、尿液、脑脊液和其他体液；*内附膜可高效回收分子量范围的有效成分；*截留回收率高达80%以上；*标注浓缩量为200μl；*使用固定转子离心机时，较大处理样本量为10ml，较大RCF为5000xg；*使用吊桶式离心机时，较大处理样本量为12ml，较大RCF为4000xg；*热密封膜较大限度地减少了下游提取物；*垂直膜的设计减少浓缩所用时间（10-15分钟）；*管体有带刻度印刷标识及可写入文字的白色的区域；*经过严格的泄漏测试。离心机转速会影响到超滤效果，因此需要根据实验要求调整相应的转速。安徽30K超滤离心管品牌

超滤离心管还可用于制备DNA文库或RNA文库，以进行基因克隆和功能研究。安徽10K超滤离心管使用方法

根据其大小，又分为1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等，国产的离心管一般就是这几个规格，用的较多的也就是10ml和50ml的。如果您的离心机是配30ml或者其他规格的离心管时，就要考虑进口的了。另外，离心管还有圆底和尖底，以及螺旋盖和插盖之分。螺旋盖的离心管带有较精细的刻度，插盖的只有一个总体的容量标示。实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的，一般塑料的用的较多，因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP（聚丙烯）、PC(聚碳酸酯)，PE(聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明，可以直观的看到样品离心情况，但是比较容易变形，抗有机溶剂的腐蚀性较差，所以使用寿命较短。因此，实验室一般会经常购买离心管。下面就对各种材质分别介绍一下。根据其材质的不同总体可以分为塑料和玻璃的，塑料的离心管用的较多，又可以分为PP、PC、PS等，根据不同需要，生产厂家会选择不同的塑料材料来进行制作。安徽10K超滤离心管使用方法