衢州100K超滤离心管厂家有哪些

蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积，还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如，当靶蛋白的分子量为35kDa时，可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd，则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上，冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后，可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。超滤离心管是一个快速、便捷的方法来从混合物中分离和提取大分子，如蛋白质、核酸等。衢州100K超滤离心管厂家有哪些

超滤离心管通常不需要预处理即可使用，不过对于蛋白质样本处理，特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化，但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失，大多数情况下，在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率，因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上，蒸馏水彻底冲洗柱子，再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用，需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。成都浓缩超滤离心管推荐使用超滤离心管时需要注意样品制备和pH调整等实验步骤，以确保较佳结果。

离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。

超滤离心管是否可以重复使用：离心超滤管通常不能消毒再次性使用。由于单管价格并不便宜，不少人尝试重复使用----经验是用蒸馏水清洗膜表面多次，离心一次到两次，那种可以反向离心的小管子可以加蒸馏水浸泡后反向多离心一次，会好些。可重复用于同一样品，不用时可用蒸馏水浸泡，但是要防止细菌污染。不同样品就不要混用了。有人说泡在20%酒精、1N的NaOH（氢氧化钠）中，防止长菌，而且防干，只要超滤膜侵了水，就不可以再让它干，但也有人说会破坏膜结构。反正厂家一般不支持重复用。多次重复使用会堵塞滤膜上的孔径，甚至出现漏液现象，影响实验结果。超滤离心管可以用于制备溶液中的化合物和分子，以进行进一步的纯化和鉴定。

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。超滤离心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成，具有强度高和化学惰性。衢州100K超滤离心管厂家有哪些

超滤离心管可以用于分离各种细胞类型，并进行进一步的培养、检测和研究。衢州100K超滤离心管厂家有哪些

我用的是3500g，4度离心，时间可以自己控制，取决于你之后的浓缩体积，我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长，不同的蛋白浓缩的速度不同，有的需要长时间离心，有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯，所用的是什么buffer，还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度，不要一下子浓缩过了，甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用，所以如果想重复使用，不要离得速度太高，4000－4500RPM就差不多了，另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹，现在的管子好像不如从前的结实了。衢州100K超滤离心管厂家有哪些