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来源: 发布时间:2023年07月04日

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上,将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时,一束激光照射磁珠上的荧光,识别磁珠标记的捕获抗体,从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子,从而实现“定性”作用。进一步,通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体,同步识别磁珠抓取的目标细胞因子,形成“三明治”结构,并加入SA-PE偶联上生物素,通过另一束激光照射进行信号放大检测,实现“定量”作用。想进行代谢因子相关研究吗?指标的选择很重要,选择Labex,给你更多的panel,总有你想做的指标。ENPP-2

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。CEACAM-1抗体芯片是将大量不同的抗原特异性结合的抗体有序地排列、固定于固相载体表面,形成微阵列。

液态流式技术(Luminex)特点:多重检测:理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品:只需低至25μl的样品体积。高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域:免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型:细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用:信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。

流式多因子检测技术(CBA)微球免疫分析系统CBA(CytometricBeadArray)是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术,可以轻松的在短时间内,同时检测多种蛋白,其作用原理利用荧光强度不同的微球,上面带有可以辨认特定蛋白的抗体(captureantibody),与样本(例如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等)及PE检测抗体(detectionantibody)作用后,以流式细胞仪进行分析,根据PE荧光强度的不同用FCAPArray软件进行分析和标准品做比对后,可进行样本内特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下优点:每次检测需25-50ul样本;灵敏度可达0.274pg/ml时间t夬速,需3-4小时,快速上样可同时测定30种蛋白,实验可重复性高利用FCAPArray软件,不论样本数目多少,可快速分析完成分析LabEx提供 Luminex——xMAP技术—微球。

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,建议是4的倍数,否则会造成浪费。蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。Pentraxin 3

LabEx实验服务项目涵盖:基因蛋白细胞组织四个层面。ENPP-2

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