Q：样本处理方案?A：血清：不含抗凝剂的**管**，室温静置2小时（避免震动，防止溶血），离心20min（4℃，2000g），取上清，建议再一次离心和取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存血浆：含抗凝剂（EDTA、肝素，具体采取哪种抗凝剂，参考说明书）的**管**，，离心20min（4℃，2000g），取上清，建议再一次离心和取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存细胞裂解液：收集细胞，PBS清洗后，离心10min（1000g，4℃），弃去上清，加入适量裂解液（107细胞对应200-300ul裂解液），放置于4℃冰箱（20min），离心10min（3000g，4℃），取上清，建议再一次离心和取上清，测定BCA总蛋白浓度，-80℃保存组织裂解液：适量RIPA裂解液加入组织中（10mg对应100-200ul裂解液），组织破碎器处理组织至匀浆（冰上处理），放置于4℃冰箱（20min），离心10min（3000g，4℃），取上清，建议再一次离心和取上清，测定BCA总蛋白浓度，-80℃保存细胞上清：离心，取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存生物标志物检测--加速推动免疫学研究进展！蛋白质组学服务公司检测服务
LUMINEX常见问题及解答（一）1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何？灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul，每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性？检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。蛋白质组学服务公司检测服务细胞因子的检测常常被用作各项疾病中预测免疫反应强度的生物标志物。
液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少（25~60μL/孔），检测指标多，可兼容血清/血浆，细胞上清，细胞/组织裂解液，脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高（部分panel可达到亚fg/ml），宽线性范围（达到6个log），具有高重复性（板内CV<6-8%，板间<10%，批间<15%），适宜多类型指标的同时测定（炎症，趋化，代谢……）。
蛋白分析实验技术1、MSD超敏电化学发光平台针对550位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示，基于电化学发光技术的MSD(MesoScaleDiscovery)是较受欢迎的5大免疫分析品牌之一。可将WesternBlot从16小时缩短至4.5小时。基本原理：电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物，在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后，电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。
Luminex液相芯片检测实验技术服务原理：Luminex：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量，节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前，Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子，包括细胞因子、自身抗体、肿块物标志物等。LabEx提供高通量蛋白组学（Olink）服务！电化学发光法msd的劣势
Luminex既能检测蛋白，又能检测核酸。蛋白质组学服务公司检测服务
抗体蛋白质芯片技术（Sengenics）优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位，可用于自身抗体结合（90%的抗体表位是非线性的）。与显示低信噪比的其他阵列相比，这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限＜10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体，只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内，线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时，0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。蛋白质组学服务公司检测服务
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