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河北技术酵母文库

来源: 发布时间:2023年03月21日

进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。酵母文库是欧易生物***服务项目。河北技术酵母文库

母文库实验由欧易生物完成。2021年3月16日,宁波大学陈剑平院士、孙宗涛研究员为共同通讯作者,在PNAS杂志(IF:9.412)在线发表了题为“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究论文,深入报道了在不同植物RNA病毒中一种***存在的、通过劫持茉莉酸信号途径以协同促进病毒传播和介体昆虫摄食的新机制。植物病毒基因组通常*编码少数几个蛋白,它们必需依赖寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通过其编码的蛋白来劫持或者利用寄主因子来实现自身的复制,并在植物体内传播,产生系统性***。黑龙江酵母文库做什么smart酵母建库和gateway酵母建库,满足各类客户的需求。

酵母文库实验本研究鉴定了一个可以与MdMYB9相互作用的蛋白MdTRB1。实验表明,MdTRB1可以正向调节花青素和原花青素的累积。MdTRB1与MdMYB9结合可以增强后者对下游基因的转录***活性。而MdTRB1与MdJAZ1的结合,可以干扰其与MdMYB9的互作,进而负向调控MdTRB1介导的对花青素和原花青素积累的促进作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9复合物可以动态调控JA介导的花青素和原花青素的积累。本研究为进一步研究JA对花青素和原花青素生物合成的调节提供了新见解。

通过酵母双杂交文库进行了互作蛋白的筛选,结果显示TaTIFY9可以与TaSRL1相互作用(下图A),并通过Bi-FC、荧光互补实验得以证实(图B-C)。TaTIFY9属于茉莉酸信号途径关键因子JAZ家族的成员之一。RT-PCR显示TaTIFY9也主要表达于小麦根部,外源施加茉莉酸可以***诱导TaTIFY9表达。这一结果表明,TaSRL1可能通过与TIFY9结合介导了茉莉酸对根生长的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特异性结合到靶基因启动子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 属于 ERF 家族。在生长素转运基因 TaPIN2 的启动子序列中含有一个 GCC-box 序列。酵母单杂交实验显示,TaSRL1 可以直接与 TaPIN2 启动子结合并***其表达(图 A),但该***作用会被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(图 B和C)。酵母文库筛选研究多年建库与筛选经验验证。

目前,欧易生物负责该水稻转录因子文库的维护和保存工作,并对广大水稻科研工作者提供转录因子筛选服务。如去年欧易生物助力中国科学院分子植物科学***创新中心的王二涛老师应用该文库对水稻-丛枝菌根进行了深入研究,成功构建了水稻-丛枝菌转录调控网络,结果发表于《Cell》封面。截至文章发表,该文库已收录了1683个水稻转录因子,隶属于54个家族,覆盖预测的水稻转录因子总量的70%。文库中水稻转录因子的a基因信息来源于PlantTFDB和KOME数据库。文库载体使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一个转录因子菌株**保存于96孔板中。酵母三杂交酵母文库数据库。广东欧易生物酵母文库

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进行了酵母双杂交筛选实验,结果显示 MdMPK3 可以与 MdWRKY17 相互作用(图 C),并且通过 BiFC、Co-IP 得以证实(图 D-E)。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升(图 B)。进一步的 BiFC 和 Co-IP 表明,MdMEK4 可以与 MdMPK3 相互作用(图 F-G)。体外激酶试验表明,MdWRKY17 能够被MdMEK4- MdMPK3 级联磷酸化(图 H)。综上,MdMEK4-MdMPK3 级联磷酸化 MdWRKY17。与对照相比,MdWRKY17过表达植株中水杨酸含量降低,而RNAiMdWRKY17植株中水杨酸含量升高(图A)。河北技术酵母文库

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