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山东酵母文库应用

来源: 发布时间:2023年03月08日

欧易生物酵母文库技术发表的又一篇高水平研究论文。植物***茉莉酸(JA)参与植物许多发育过程的调控。JAZ蛋白是茉莉酸信号反应的阻遏物,通过抑制JA转录调节剂来负向调节JA信号。花青素和原花青素是种子、叶、花和果实中重要的植物次生代谢产物,可充当抗氧化剂,帮助***活性氧和对**老,对人类健康具有重要价值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的转录受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的调控。其中,苹果MYB转录因子MdMYB9参与调控JA介导的花青素和原花青素的生物合成,但其分子机制仍有待深入研究。酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸。山东酵母文库应用

进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。福建生物技术酵母文库报价酵母文库筛选方案可提供核体系和膜体系筛库工作。

通过酵母双杂交文库进行了互作蛋白的筛选,结果显示TaTIFY9可以与TaSRL1相互作用(下图A),并通过Bi-FC、荧光互补实验得以证实(图B-C)。TaTIFY9属于茉莉酸信号途径关键因子JAZ家族的成员之一。RT-PCR显示TaTIFY9也主要表达于小麦根部,外源施加茉莉酸可以***诱导TaTIFY9表达。这一结果表明,TaSRL1可能通过与TIFY9结合介导了茉莉酸对根生长的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特异性结合到靶基因启动子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 属于 ERF 家族。在生长素转运基因 TaPIN2 的启动子序列中含有一个 GCC-box 序列。酵母单杂交实验显示,TaSRL1 可以直接与 TaPIN2 启动子结合并***其表达(图 A),但该***作用会被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(图 B和C)。

酵母文库研究:棉花是世界上天然纤维的主要来源。近年来,气候变化给植物带来的干旱、高盐等渗透胁迫,使棉花产量稳步下降。为适应变化莫测的气候,植物不断进化出复杂而有组织的应对非生物胁迫的反应机制,其中数千个抗性相关基因间的相互作用,在提高植物的抗旱性和耐盐性中发挥着重要作用。功能基因组学研究表明,植物胚胎发育晚期丰富蛋白(LEA)就是这样一种基因,它在植物发育过程中,面对多种环境胁迫时均有表达,对提高植物的抗旱性和耐盐性具有重要作用。2022年3月,中国农业科学院棉花研究所在国际期刊上发表了BiologicalMacromolecules上发表了题为“LateembryogenesisabundantgeneLEA3(Gh_A08G0694)enhancesdroughtandsaltstresstoleranceincotton”的研究论文,该研究发现LEA3能够增强棉花的抗旱性和耐盐性。该项目中所用的棉花酵母文库由欧易生物构建。酵母杂交技术兼具通量高、结果直观、操作简易,重复性好的优势。

欧易酵母文库助力小麦根长抑制分子机制研究,近日,中国农业科学院作物科学研究所景蕊莲研究员、河南农业大学王翔副教授为共同通讯作者,在 Journal of Experimental Botany 杂志(IF: 6.992)在线发表了题为“小麦短根长度 1文章中酵母双杂交文库由欧易生物完成。本研究从小麦中克隆了一个新的 ERF 转录因子基因 TaSRL1 (SHORT ROOT LENGTH 1),该基因主要在根中表达。综上,本研究证明了 TaSRL1 在生长素依赖途径中作为 taPIN2 的直接调控因子,并通过与 TaTIFY9 相互作用,整合生长素和 JA 信号,抑制根的生长。TaSRL1-4A 标记对小麦根系、株形和产量的改良具有重要意义。酵母单杂交/双杂交文库构建简述酵母双杂交。欧易生物酵母文库

什么是酵母文库的构建? 只需构建自己需要研究蛋白的BD载体,就能和本司**储备的酵母文库进行筛库实验。山东酵母文库应用

酵母单杂交筛选:(4)在筛选到的转录因子中,***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达,并与HIV的其他转录***因子,即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用,本研究中显示HEK293T细胞中,***GL1过表达后,与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍,说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是,文章的背景介绍内容中,对应用其他技术(如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等)对HIV转录调控方向的已有成果分析,发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解,但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术(如Chip-seq、motif预测)进行了比较分析,发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%,同等或优于其他技术。山东酵母文库应用

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