通过传统的酵母双杂交系统，以PtDAL1为诱饵，筛选样本来源于不同年龄段的油松cDNA文库。将获得的阳性克隆，10个一组，挑选到1个96孔板的PCR板孔中，获得10*96个阳性克隆的96孔板。以其中阳性克隆mix为模板，进行PCR扩增，并将所有的PCR产物进行纯化。使用纯化后的PCR产物，进行打断后构建二代测序文库，通过NGS测序，获得6G的阳性克隆数据。通过分析二代测序数据，获得阳性克隆基因信息（去冗余后获得135个互作子，包含21个TFs，2个TRs及酶类、热激蛋白、RNA结合等蛋白，部分见表1）。挑选重要的候选基因进行一对一验证（图2）。与拟南芥中同源基因AGL6的蛋白互作网络进行比对分析。对DAL1互作蛋白（DIPs）的基因表达谱、启动子中的顺势作用元件功能进行分析，并对DIPs进行GO注释（图3）。综合生信分析结果，构建针叶树老化途径的调控模型（图4）。文库质粒与酵母文库载体重组。河北品质酵母文库
酵母单杂交测试：为验证该文库在Y2H和Y1H体系中的有效性，作者以OsMADS1为诱饵筛选水稻转录因子文库，进行了酵母双杂交测试。以Ghd7的启动子片段为诱饵，进行了酵母单杂交测试。结果显示我们的水稻转录因子文库可以有效且高通量的检测蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF间的相互作用。另外，该研究中指出，使用该文库筛选鉴定蛋白-TF互作，采用mating法较为方便，即Y2HGold-Bait诱饵菌液与Y187-TF文库菌液一对一杂交。而筛选鉴定DNA-TF互作，采用Y1HGold系统，即Y1HGold-pomoter筛选TF文库质粒更简单高效。此外，可通过降低筛选压力处理，进行弱相互作用的检测。吉林品质酵母文库报价酵母双杂交技术服务酵母双杂交文库构建。
酵母文库实验：本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2，它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实，MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作，这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外，异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明，MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示，培养 45 天，苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加（图 A-C）。
利用酵母双杂交技术进行筛选，结果显示SP8可以与水稻OsMYC3蛋白相互作用，并且二者互作关系通过酵母一对一互作、BiFC、Co-IP、LCI实验得以验证（图A-C）。利用截短的SP8进行酵母一对一互作和Co-IP检测表明，与OsMYC3的结合依赖于SP8的NTP结构域（图D-E）；同样，OsMYC3的TAD结构域也是二者互作所必不可少的（图F）。酵母双杂交、BiFC实验表明，OsMYC3可以与OsJAZ相互作用。经茉莉酸处理，野生对照株根的长度明显被抑制、一系列JA生物合成和信号传导相关基因表达量上升，但Osmyc3突变体中抑制程度减轻、JA相关基因表达量上升减少。酵母双杂交文库构建实验流程。
酵母文库实验:本研究报道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈现亚功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表达，而 OsNF-YB9 主要在发育中的胚乳中表达。在拟南芥 lec1-1 中异源表达 OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以弥补 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失导致种子发育异常，种子变长、变窄、变薄，垩白率较高。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相关基因的表达紊乱。OsNF-YB9 可以与主要在水稻胚乳中表达的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突变体种子与 osnf-yb9 突变体种子都表现出垩白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和拟南芥中的异位表达导致了种子变小。综上表明，OsNF-YB9 在水稻种子发育中起到关键调控作用。酵母文库筛库欧易生物。河南发展酵母文库
博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选的工作。河北品质酵母文库
酵母单杂交筛选：（4）在筛选到的转录因子中，***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达，并与HIV的其他转录***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中显示HEK293T细胞中，***GL1过表达后，与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍，说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是，文章的背景介绍内容中，对应用其他技术（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）对HIV转录调控方向的已有成果分析，发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解，但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术（如Chip-seq、motif预测）进行了比较分析，发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%，同等或优于其他技术。河北品质酵母文库
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