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河北欧易生物空间转录组使用

来源: 发布时间:2021年11月26日

空间转录组技术原理是什么?当组织冷冻切片附在空间转录组载片上时,条形码引物结合并从组织中捕获邻近的mRNA。被捕获的mRNA开始逆转录,得到的cDNA中包含了空间条形码。分析Illumina测序结果中空间条形码的序列,可以将每个mRNA转录的序列映射回组织切片中的起始位置。空间转录组的条形码逆转录oligo(dT)引物在显微镜载玻片表面的有序附着,空间转录组使得在mRNA样品处理和后续测序过程中位置信息的编码和获取成为可能。欧易生物具有上百例空间转录组项目执行经验,致力通过质量的服务,助力各位科研工作者取得新的突破。在未来的5-10年里,空间转录组学妥妥的是技术热点。河北欧易生物空间转录组使用

和单细胞转录组一样,空间转录组也可以进行细胞间通讯分析,区别在于空间位置信息可以同时用于识别潜在的细胞间相互作用。通常通过了解配体受体(LR)对并测试 LR 对是否更有可能在邻近细胞或 spot 中表达来完成。还有很多其他类型的分析可用于空间转录组学数据,包括基因模式的识别,空间区域的转录组定义, 基因间的相互作用推断,转录本的亚细胞定位以及基于H&E图像的基因表达估算等。1. 欧易生物具有上百例空间转录组项目执行经验,致力通过质量的服务,助力各位科研工作者取得新的突破。河北欧易生物空间转录组使用如何通过“HE染色”判断空间转录组项目样本是否为“好的样本”呢?

基于原位测序的空间转录组技术。基于原位测序(ISS)的方法通过测序产生空间转录组信息,这种方法只依靠连接酶连接两段DNA—一段已知序列的引物和一个探针与模板匹配,不匹配的探针就会被洗掉。2013年开发的ISS中,每个探针使用一个查询碱基来测序基因条形码。FISSEQ和后来的EXeq使用了SOLiD,每个探针使用两个查询碱基来测序环化和RCA扩增的cDNAs。在STARmap中,基因条形码由SEDAL测序,其中还使用了两个类似固体的查询碱基来避免错误。BARseq还用基因条形码放大了RCA探针。基于ISS技术的优势包括:单细胞分辨率、亚细胞转录物定位和可应用于更大的组织区域。缺点是:检测效率较低。

如果只是通过空间转录组或者单细胞转录组,研究人员在两个样本中均可以发现淋巴细胞相关基因或者淋巴细胞群,无法解释两个样本预后之间的差异。但是通过空间转录组,就能很清晰看到两个样本之间的差异。作者借助空间转录组测序技术探究人类心脏在发育过程中的基因表达特征和细胞图谱变化,发现对于每个发育阶段的不同解剖区域,都有独特的基因表达特征。结合单细胞转录组测序技术,作者进一步确定和丰富了胚胎心脏基因表达的空间注释信息。 正是由于空间转录组可以从多维度解析生物学过程的特点得到蓬勃发展。

美国脑计划启动的 BICCN 项目,该项目将整合不同类型细胞的分子、解剖学和生理学特性,创建小鼠脑细胞 3D 参考图谱,同时也将基于人类和非人类灵长类脑组织样本,绘制脑细胞参考图谱 ,其涉及空间转录组学技术主要包括 MERFISH 和 seqFISH。一些实现空间转录组学的重要技术,可以追溯到二十世纪七十年代,长期以来,各种形式的原位杂交技术(ISH)已用于可视化空间中的基因表达。从技术原理中不难看出,空间转录组技术重要为特殊的载玻片。空间转录组学技术主要包括 MERFISH 和 seqFISH。广东欧易生物空间转录组领域

研究的***主要集中于人类和小鼠的大脑,而其他***(例如肝脏)的空间转录组学研究相对滞后。河北欧易生物空间转录组使用

1. 空间转录组是一种用于从空间层面上解析RNA-seq数据的技术,从而解析单个组织切片中的所有mRNA。空间转录组的条形码逆转录oligo(dT)引物在显微镜载玻片表面的有序附着,空间转录组使得在mRNA样品处理和后续测序过程中位置信息的编码和获取成为可能。单细胞RNA测序或组织样本RNA测序,均无法为研究人员提供精确的空间信息。通过空间转录组技术可获取组织中具体的位置的转录信息,为研究和诊断提供有效数据支撑。10x Genomics空间转录组技术可以应用于免疫、发育、神经和病理等研究方向。河北欧易生物空间转录组使用

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